諾華CAR-T療法做不到的，這些免疫細胞療法新物種竟然做到了

提起免疫細胞療法，大家首先想到的肯定就是諾華的Kymriah和凱特的Yescarta。這是目前全球僅有的兩款經(jīng)監(jiān)管機構(gòu)批準上市的CAR-T療法。這兩款CAR-T療法均為自體CAR-T，只能治療血液腫瘤，它們拿實體瘤無招。那么，實體瘤患者是否只能望免疫細胞療法而興嘆了呢？且慢，讓萬海君慢慢向你道來。近年來，免疫細胞療法產(chǎn)生了一些“新物種”，它們終于代表免疫細胞療法向?qū)嶓w瘤集中火力開火，而且費用更低，有的可實現(xiàn)現(xiàn)貨供應(yīng)，讓更多癌癥患者有了更多選擇，更有了更多新生希望！這些“新物種”都有哪些呢？ 

CAR-NK療法

今年6月28日，期刊《細胞·干細胞》（CellStem Cell）發(fā)表了一項新研究，來自于加州大學(xué)圣地亞哥分校醫(yī)學(xué)院和明尼蘇達大學(xué)的研究人員報告稱：經(jīng)過CAR修飾的衍生自人誘導(dǎo)多能干細胞(iPSC)的自然殺傷(NK)細胞(NK-CAR-iPSC-NK cells)，同CAR-T免疫療法所發(fā)揮的抗癌作用類似，在小鼠卵巢癌模型中表現(xiàn)出了增強的抗腫瘤活性。

在這項研究中，小組人員在卵巢癌異種移植小鼠模型中測試了源自人類iPSC的CAR NK細胞，并比較了它們與其他版本的NK細胞以及CAR-T細胞的抗腫瘤活性。結(jié)果表明：iPSC來源的CAR-NK細胞表現(xiàn)出與CAR-T細胞相似的活性，但毒性較低。對此，該論文通訊作者、加州大學(xué)圣地亞哥分校細胞治療部門負責人Dan S. Kaufman博士表示，數(shù)據(jù)顯示卵巢癌是一個很好的第一目標，但包括乳腺癌、腦腫瘤和結(jié)腸癌等在內(nèi)的實體瘤，以及白血病等血液腫瘤也可能是潛在的治療對象。

Kaufman博士解釋說：“免疫治療的主要挑戰(zhàn)之一是改良細胞的臨床培育。我們已經(jīng)證明，可以改造iPSC，分化出表達有嵌合抗原受體（CAR）的NK細胞，從而更好地對抗難以治療的癌癥?！毖芯咳藛T表示，這些發(fā)現(xiàn)非常重要，因為NK細胞可能比T細胞具有更明顯的優(yōu)勢，包括能夠以現(xiàn)貨(off the shelf)的方式提供安全性更高工程化的NK細胞，而無需進行患者匹配。具體來說，CAR-NK療法具有哪些優(yōu)勢呢？ 

1、CAR-NK療法對實體瘤和血液腫瘤通殺

除了血液腫瘤之外， CAR-NK療法同樣在實體瘤研究中取得顯著效果。NK細胞表面活化受體NKG2D的配體在大多數(shù)惡性腫瘤細胞中表達，因此，利用NK細胞表面NKG2D的胞外區(qū)直接與CD3ζ結(jié)合，同時以DAP10作為第二信號分子，更大程度地增強NKG2D的表達，放大下游的活化信號，這樣的設(shè)計在急性淋巴細胞白血病、前列腺癌和橫紋肌肉瘤等多種惡性腫瘤細胞系中殺傷效果明顯。

2、CAR-NK細胞可規(guī)?；a(chǎn)

目前所用的CAR-T細胞，其制備需要從患者自身抽取血液分離T細胞進行改造，而晚期腫瘤患者自身免疫細胞弱化，分離出的細胞狀態(tài)較差，增值速度較慢，在培養(yǎng)的過程中可能出現(xiàn)細胞死亡的情況。正常的培養(yǎng)周期是30天，這對于癌癥患者無疑是非常漫長的過程。而CAR-NK細胞，是由穩(wěn)定的細胞株改造而來，細胞狀態(tài)穩(wěn)定，質(zhì)量均一，從而解決了從病人抽血、個性化制備的局限，可以大規(guī)模生產(chǎn)，增強了治療的通用性和簡易性，有望改變傳統(tǒng)免疫治療繁雜的模式，使其成為藥品一樣現(xiàn)成的易得治療方式，實現(xiàn)現(xiàn)貨(off the shelf) 供應(yīng)。

3、CAR-NK療法可激發(fā)患者體內(nèi)長效繼發(fā)免疫

CAR-NK療法可以及時、大規(guī)模殺傷腫瘤細胞，并使凋亡的腫瘤細胞大量釋放多種腫瘤抗原(neoantigens)，從而激活樹突狀抗原遞呈細胞、殺傷T細胞和T記憶細胞。因此CAR-NK療法不僅起到短期大量殺傷腫瘤的作用，還有長效激發(fā)免疫的作用。

4、CAR-NK療法治療費用相對較低

美國FDA批準上市的兩款CAR-T療法，諾華Kymriah定價47.5萬美元，凱特Yescarta定價37.3萬美元，按今日（2018年7月24日）匯率計算，折合人民幣分別為3235510 元、2540726.8元，動輒兩三百萬元，如此昂貴的治療費用，堪稱奢侈品了，平民百姓根本用不起。而CAR-NK細胞可以大規(guī)模培養(yǎng)，縮減了治療成本，使之真正成為一項普通人也能享受的“平價”免疫細胞治療技術(shù)。

CAR-巨噬細胞免疫療法

今年6月27日，一家專注于開發(fā)細胞免疫治療藥物的公司——Carisma Therapeutics宣布完成了5300萬美元的A輪融資，以推進其獨特的CAR-巨噬細胞免疫(CAR-MA)療法技術(shù)平臺的發(fā)展，并將一些成熟項目推向臨床。值得注意的是，這家公司的技術(shù)特點是將CAR與巨噬細胞相結(jié)合，而不是T細胞相聯(lián)合，因此被認為有望成為變革性的腫瘤免疫療法。 

Carisma開創(chuàng)了CAR-巨噬細胞免疫療法平臺，以進行藥物的發(fā)現(xiàn)與開發(fā)。該方法首次將抗原識別與巨噬細胞的效應(yīng)功能相結(jié)合的技術(shù)。這樣的雙重作用機制不僅可以直接殺死靶細胞，還可以利用抗原呈遞細胞的生物學(xué)特性來獲得適應(yīng)性免疫應(yīng)答的能力。

這種技術(shù)將CAR與巨噬細胞而不是T細胞聯(lián)合，以創(chuàng)造比CAR-T更好地用于治療實體瘤的方法。因為修飾的T細胞很難進入實體瘤而在免疫抑制性的微環(huán)境中存活，使得其效果比在血液癌中的效力更弱。而巨噬細胞比T細胞的優(yōu)勢在于，他們在腫瘤微環(huán)境中能夠更好地爭奪氧氣和營養(yǎng)，使其成為這些區(qū)域中的優(yōu)勢免疫細胞，有望成為治療實體惡性腫瘤的可能候選者。

基于這個想法，Carisma希望從癌癥患者身上攝取巨噬細胞，并對其進行修飾使其表達能夠識別腫瘤抗原的CAR，再進入患者本人的體內(nèi)，修飾后的巨噬細胞就會滲入實體瘤并吞噬癌細胞。同時，巨噬細胞也會將腫瘤抗原片段呈遞給T細胞以引發(fā)免疫反應(yīng)。

基于這種機制，該平臺的候選藥物最早申請用于治療實體瘤，其他潛在的應(yīng)用還包括在多發(fā)性疾病狀態(tài)下的蛋白質(zhì)聚合體破壞。該公司預(yù)計將于2019年將首款候選藥物推向臨床。

TCR-T療法

TCR-T療法同CAR-T療法一樣，也是通過基因改造的手段提高T細胞受體對特異性癌癥細胞抗原的識別能力和進攻能力，TCR-T的原理是將患者的腫瘤浸潤性淋巴細胞（TILs）中，可通過限制性抗原識別殺傷腫瘤的T細胞提取，利用基因克隆技術(shù)獲取其T細胞受體（TCR）序列，再利用載體將該段基因轉(zhuǎn)染至更多的T細胞上，使識別該抗原的T 細胞上萬倍的增長。TCR-T來自于TCR，因此可識別來源于細胞核、胞漿、胞膜的各種抗原。 

自體CAR-T療法目前只能治療血液腫瘤，而TCR-T療法主要是針對實體瘤。例如，在凱特的在研TCR-T療法，靶向的是MAGE A3抗原。這種癌癥抗原在膀胱癌、食管癌、宮頸癌、頭頸癌、肺癌、卵巢癌、以及其他癌癥中普遍存在。按設(shè)想，這款療法有望能對多種實體瘤進行治療。

在凱特這款在研TCR-T療法的一項劑量遞增研究中，17名患有轉(zhuǎn)移性實體瘤的患者在化療后，接受了MHC II類限定，針對MAGE A3的TCR-T療法。其中，4名患者出現(xiàn)了緩解，1名轉(zhuǎn)移性宮頸癌患者出現(xiàn)了完全緩解，并持續(xù)了29個月。此外，3名患者出現(xiàn)了腫瘤尺寸的縮小，他們體內(nèi)的TCR-T細胞水平在治療的一個月后也有顯著上升。這3名患者里，一名患有尿路上皮癌的患者在治療后的第19個月時還處于部分緩解中。該研究中沒有出現(xiàn)預(yù)料外的脫靶毒性，也沒有出現(xiàn)和治療相關(guān)的死亡事件。

通用型CAR-T療法

通用型CAR-T療法就是異體CAR-T療法。顧名思義，這種療法有別于諾華Kymriah和凱特Yescarta的自體CAR-T療法，它的T細胞來源于健康供者，不像自體CAR-T療法需要從患者血液中提取T細胞，保證了T細胞質(zhì)量。萬海的在研產(chǎn)品第五代CAR-T療法就屬于異體（通用型）CAR-T療法。萬海通用型CAR-T療法由于能規(guī)?；苽浼毎涩F(xiàn)貨供應(yīng)，不僅大大降低了費用，還縮短了患者等待的時間，而且這種療法增加了安全開關(guān)，大大降低了自體CAR-T療法常見的細胞因子風暴的風險。 

萬海的通用型CAR-T療法具有以下七大優(yōu)勢：

（1）采用基因編輯技術(shù)敲除T細胞表面的TCR，消除GvHD排異反應(yīng)。

（2）敲除HLA-I基因，延長CAR-T細胞在體內(nèi)的存活時間，降低復(fù)發(fā)率。

（3）人源化scFv（胞外的抗原結(jié)合域）序列，降低人抗鼠抗體反應(yīng)（HAMA）。

（4）提供安全開關(guān)，解決治療安全風險。

（5）提高T細胞殺傷力，療效更顯著。

（6）規(guī)模標準化制備，降低90%成本，費用相對較低。

（7）通用化，適用人群廣泛，周期短，能產(chǎn)業(yè)化推廣應(yīng)用。

上面這些免疫細胞療法“新物種”，不再局限于血液腫瘤，擴大了適應(yīng)癥，而且費用更低，讓普通患者都能用得起。期待這些免疫細胞療法早日應(yīng)用于臨床，讓更多的癌癥患者受益。